酶標儀的分類

光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩，是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光，但對綠色不吸收，反射出來，所以植物呈現為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。

隨著檢測方式的發展，擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀，可檢測吸光度（Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光（TRF)、熒光偏振（FP)、和化學發光（Lum)。

酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內的任意波長，而濾光片型酶標儀則根據選配的濾光片，只能截取特定波長進行檢測。

酶標儀的采購建議

測定的吸光度范圍通常，酶標儀的吸光度測定范圍在0～2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在0～2.5之間，但現在基本上都做了拓寬，可達到3.5以上，并且能保持很好的精密度與線性。因此，對于酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍，主要要看在一定的吸光度范圍內的線性和精密度如何。

光學系統，酶標儀的光學系統采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道，亦有單通道)檢測，一般為硅光管或光導纖維，除測定通道外，有的酶標儀還有一個參比通道，每次測定可進行自我校準。酶標儀的光學系統功能如何，均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準確度等體現出來。光學系統好的話，則上述指標也應較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關系。單通道可避免因通道不同所致的差異。

酶標儀的檢驗

1、重復性：在一定條件下所獲得的獨立的測定結果之間的一致性程度即可重復性，可用CV值來表示。在某一特定的濾光片下測定某一塊酶標板20次，用統計學方法求出所有測量值的均值和標準差。公式如下：

所有測量值的標準差

CV%=————————————×所有測量值的均值

2、準確性：待測物的測定值與一可接受的參考值之間的差異。此項指標需用雷勃公司標準板（PVT）來測。

測量值-參考值

準確性=——————————×參考值

3、光路檢測：將一塊酶標板正放測量一次，再將酶標板反放測量一次，查看同一孔吸光值是否相同，從而查看其所有光路8通道是否均一。

⑴查看光路上的透鏡是否清潔。

⑵燈泡好否及亮度是否正常。

⑶濾光片是否清潔。

4、載軌運動：開機后酶標儀能否自檢，自檢結束后撳“開始”，查看載軌運動是否正常及有無噪聲。

5、按鍵膜的好壞：開機后試用所有按鍵膜，查看其功能是否完好。

如何使用MK3酶標儀測吸光度

1.將實驗待測樣品分裝到多孔板上。96孔板推薦每孔100ul -200ul體積，384孔板推薦每孔50ul-80ul體積為宜。如因實驗需要，同一塊多孔板上不同孔的樣品體積無法保持一致，需選用帶光程矯正功能的酶標儀，將光程矯正到統一的數值，例如Molecular Devices品牌的酶標儀。

2.打開儀器 的微孔板艙門，將多孔板放置入儀器內并關上艙門。

3.打開儀器軟件，在實驗參數設置界面選擇ABS功能。根據實驗目的可選擇不同的檢測模式（Reader Type），包括終點法（Endpoint）、動力學法(Kinetic)、孔域掃描(Well Scan)和光譜掃描(Spectrum)。

4.設置波長，版型，然后讀板，得到數據。