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分光光度計的工作原理
以下內(nèi)容由萊普特為您提供,希望對同行業(yè)的朋友有所幫助。
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質(zhì)的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質(zhì)的濃度;
分光光度計使用過程中問題及解決方法
1) 測量過程中,“”點經(jīng)常變動。可能原因:
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表面有液滴。解決方法:用擦鏡紙擦干凈比色皿表面,然后將其安放在比色槽的左邊,上面用定位夾定位。
b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)。解決方法:送修。
2)數(shù)顯不穩(wěn)。可能原因:
a)預(yù)熱時間不夠。解決方法:延長預(yù)熱時間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因,長時間處于工作狀態(tài)時,也會工作不穩(wěn))。
b)光電管內(nèi)的干燥劑失效,使微電流放大器受潮。解決方法:烘烤電路,并更換或烘烤干燥劑。
c)環(huán)境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。解決方法:改善工作環(huán)境。
d)光電管、電路等其它原因。解決方法:送修。
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分光光度計的應(yīng)用范圍
超微量紫外可見分光光度計是一類很重要的分析儀器,無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域,還是在化工、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門,超微量紫外可見分光光度計都有廣泛而重要的應(yīng)用。超微量紫外可見分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析,常用于核酸,蛋白定量及細(xì)胞培養(yǎng)檢測;超微量紫外可見分光光度計已經(jīng)是現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。
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