3分鐘前 大鼠腦缺血再灌注模型構建信賴推薦 南京英瀚斯[英瀚斯2eefa30]內容:缺血再灌注模型由于一些因素相互作用,導致神經元si亡、神經元功能障礙、神經元結構改變等一系列的病理變化,zui終導致腦功能損害和神經行為異常。腦缺血再灌注模型是研究缺血性腦血管病的重要工具,也是篩選和評價神經保護yao物的有效平臺。近年來,許多中西yao物和中藥復方在該模型上顯示出了一定的神經保護作用,如gan草酸、丹參酮ⅡA、白芍總苷、乙酰半胱氨酸、甘露chun等。這些yao物通過抑制細胞凋亡、減輕yan癥反應、清除氧自由基、抑制谷氨酸釋放、調節鈣平衡、促進自噬等機制,減少腦缺血再灌注損傷造成的神經元si亡和功能障礙,改善腦組織結構和神經行為表現。
(二)MCAO模型制備的操作方法與步驟
1.線栓的制備 選用直徑為0.26mm的釣魚線,用鋒利薄刀片將線身垂直截成5cm長的小段,用細砂紙打磨頭端棱角,在體視鏡下選出頭端光滑鈍圓、大小一致者。用記號筆在距線栓頭端20mm處做一標記,將線栓浸泡消毒后晾干。術前置于無菌生理鹽水中備用,線栓臨用前浸蘸2.5×1000000U/L肝素鈉。
2.術前動物準備 分籠飼養(室溫20~23℃,濕度60%~70%),明暗光照12h:12h,適應性飼養1~2d,并按實驗動物使用的3R原則給予人道關懷。術前12h禁食,自由飲水。
4.手術步驟 手術按外ke無菌原則操作。
①備皮,碘伏消毒皮膚。
②于正中線旁開約5mm處,行頸部右側縱行切口,剪開淺筋膜,暴露右側胸鎖乳突肌,在胸鎖乳突肌與頸前肌群之間向深部鈍性分離,暴露頸動脈鞘,玻璃分針游離頸總動脈(CCA)和迷走神經,直至 CCA分叉處。鈍性分離向內行走的頸外動脈(ECA)及向外后行走的頸內動脈(ICA)。
顯微鏡(小鼠需要),血管夾,尖頭直鑷,尖頭彎鑷,顯微剪,縫合線,縫合針,線栓,棉球,75% 酒精,生理鹽水,電凝筆,動物加熱墊,電動剃毛器,牽開器。