3分鐘前 大鼠腦缺血再灌注模型構(gòu)建信賴(lài)推薦 南京英瀚斯[英瀚斯2eefa30]內(nèi)容：缺血再灌注模型由于一些因素相互作用，導(dǎo)致神經(jīng)元si亡、神經(jīng)元功能障礙、神經(jīng)元結(jié)構(gòu)改變等一系列的病理變化，zui終導(dǎo)致腦功能損害和神經(jīng)行為異常。腦缺血再灌注模型是研究缺血性腦血管病的重要工具，也是篩選和評(píng)價(jià)神經(jīng)保護(hù)yao物的有效平臺(tái)。近年來(lái)，許多中西yao物和中藥復(fù)方在該模型上顯示出了一定的神經(jīng)保護(hù)作用，如gan草酸、丹參酮ⅡA、白芍總苷、乙酰半胱氨酸、甘露chun等。這些yao物通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡、減輕yan癥反應(yīng)、清除氧自由基、抑制谷氨酸釋放、調(diào)節(jié)鈣平衡、促進(jìn)自噬等機(jī)制，減少腦缺血再灌注損傷造成的神經(jīng)元si亡和功能障礙，改善腦組織結(jié)構(gòu)和神經(jīng)行為表現(xiàn)。

(二)MCAO模型制備的操作方法與步驟

1.線栓的制備 選用直徑為0.26mm的釣魚(yú)線，用鋒利薄刀片將線身垂直截成5cm長(zhǎng)的小段，用細(xì)砂紙打磨頭端棱角，在體視鏡下選出頭端光滑鈍圓、大小一致者。用記號(hào)筆在距線栓頭端20mm處做一標(biāo)記，將線栓浸泡消毒后晾干。術(shù)前置于無(wú)菌生理鹽水中備用，線栓臨用前浸蘸2.5×1000000U/L肝素鈉。

2.術(shù)前動(dòng)物準(zhǔn)備 分籠飼養(yǎng)(室溫20～23℃，濕度60％～70％)，明暗光照12h：12h，適應(yīng)性飼養(yǎng)1～2d，并按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R原則給予人道關(guān)懷。術(shù)前12h禁食，自由飲水。

3.動(dòng)物麻zui 以3.6％水合氯醛腹腔內(nèi)注射麻zui(10ml/kg)，注射qi針頭從腹部向頭方向刺入腹腔，回抽針芯阻力較大、無(wú)回血、無(wú)胃腸道內(nèi)容物時(shí)，緩慢推注。約10min后大鼠逐漸癱軟，反應(yīng)淡漠，用手牽拉鼠尾無(wú)明顯反抗時(shí)置仰臥位，固定上頜中切牙和四肢。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中維持大鼠肛溫在37℃左右，直到恢復(fù)活動(dòng)。

4.手術(shù)步驟 手術(shù)按外ke無(wú)菌原則操作。

①備皮，碘伏消毒皮膚。

②于正中線旁開(kāi)約5mm處，行頸部右側(cè)縱行切口，剪開(kāi)淺筋膜，暴露右側(cè)胸鎖乳突肌，在胸鎖乳突肌與頸前肌群之間向深部鈍性分離，暴露頸動(dòng)脈鞘，玻璃分針游離頸總動(dòng)脈(CCA)和迷走神經(jīng)，直至 CCA分叉處。鈍性分離向內(nèi)行走的頸外動(dòng)脈(ECA)及向外后行走的頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。

研究zhong風(fēng)時(shí)可采用的一種動(dòng)物模型。該技術(shù)可以構(gòu)建永jiu性梗阻或短暫的梗阻。如果在一定時(shí)間間隔（30 min，1 h，2 h）后拔出線栓縫合，則實(shí)現(xiàn)再灌注(短暫 MCAO)；如果線栓保持原位（24 h），則用于永jiu性的大腦中動(dòng)脈閉塞模型（永jiu MCAO）。

顯微鏡（小鼠需要），血管夾，尖頭直鑷，尖頭彎鑷，顯微剪，縫合線，縫合針，線栓，棉球，75% 酒精，生理鹽水，電凝筆，動(dòng)物加熱墊，電動(dòng)剃毛器，牽開(kāi)器。