高架十字迷宮試驗 ：

EPM ) 既可以建立焦躁應激的模型也是國際上公認的經典測量焦躁反應的方法。其原理是利用動物對新異環境的探究特性和對高懸敞開臂的恐 懼心理, 形成動物的矛盾沖突來考察大鼠的焦躁狀態。 EPM 測試的項目中, 焦躁動物的 OE% 和 OT% 會明顯降低, 經典抗焦躁藥則使兩者升高, OE + CE 反映了動物的運動活性。本研究發現模型組大鼠的 OE% 和 OT% 顯著下降, 運動活性也降低。HD反映了動物在非保護區內的探索行為, 代表動物對陌生環境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避, 與焦躁程度有一定相關性, 本研究中空瓶應激后的大鼠 HD行為減少; RR可用來觀察藥有無鎮靜作用及鎮靜強度。上述結果證實, 慢性應激后的大鼠明顯處于焦躁狀態, 說明慢性焦躁應激大鼠模型的制備成功, 且通過量化的標準客觀反映出大鼠的焦l慮程度。

一、實驗概述

八臂迷宮（radial arm maze）實驗是為常用的評價動物學習記憶能力的模型之一，由Olton等人于20世紀70年代中期建立。其基本依據是，控制進食的動物受食物的驅使對迷宮各臂進行探究，經過一定時間的訓練，動物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時測定動物的工作記憶（working memory）和參考記憶（reference memory）。八臂迷宮操作簡便、可行，而且能區分短期的工作記憶和長期的參考記憶，現已被廣泛用于學習記憶功能評價。

二、實驗儀器

灌注固定主要用于神經系統，其他組織意義不是很大，而且耗時耗力。對神經系統防止變性效果較好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半，這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白，針頭要從心軸方向進針，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，開始灌流后剪破右心耳，約 40 毫升生理鹽水，后再灌流約 20 毫升多聚甲醛，整個灌流固定的過程就完成了。

灌注固定主要用于神經系統，其他組織意義不是很大，而且耗時耗力。對神經系統防止變性效果較好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半，這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白，針頭要從心軸方向進針，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，開始灌流后剪破右心耳，約 40 毫升生理鹽水，后再灌流約 20 毫升多聚甲醛，整個灌流固定的過程就完成了。

大鼠慢性造模SOP

一、實驗材料

水合氯醛

標準致病大腸埃希菌

手術縫線

SD大鼠（雄性，6周齡）

二、實驗方法

2.1大腸埃希菌37℃血瓊脂培養12h,然后使用生理鹽水配置濃度為1.5×108/mL的菌液，將菌液與0.2%瓊脂1:1混合備用。

2.2常規消毒手術器械，使用10%水合氯醛(0.4mL/100g)腹腔注射大鼠，備皮并消毒手術部位。在下腹正中做長度約1-1.5cm縱向切口，bao露膀胱，然后輕輕拉出膀胱，可以觀察到膀胱后頸部的（雙葉）。將輕輕夾起，用1mL向內注入菌液瓊脂混合物（每葉各0.1mL），縫合切口，常規飼養4周。