病理染色-Masson
大鼠組織Masson染色效果
大鼠心梗Masson染色效果
Masson染色是顯示膠原纖維分布的經(jīng)典染色方法,利用染色的兩種不同分子量的陰離子在組織滲透性的差異,根據(jù)不同的滲透性能差異,區(qū)分出不同的組織成分。經(jīng)Masson染色后,膠原纖維呈現(xiàn)藍(lán)色,肌纖維紅色,細(xì)胞核藍(lán)黑色。
Masson染色可用作心梗模型、肺纖維化、肝纖維化以及纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。
病理實(shí)驗(yàn)外包,冰凍切片取樣實(shí)驗(yàn)步驟:一、 取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或小盒內(nèi)(直徑約2 cm)。“英瀚斯”為Enhancer音譯,寓意“英瀚斯”能像Enhancer在基因表達(dá)中起到增強(qiáng)作用一樣,促進(jìn)客戶的科研進(jìn)程,提,讓客戶的科研idea迅速付諸實(shí)施,真正做到“思考留給科學(xué),實(shí)驗(yàn)外包出去”。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒(méi)組織,然后將小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開(kāi)始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20 s組織即迅速冰結(jié)成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。5.若需要保存,應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆谩H⒐潭?.樣品托上涂一層OCT包埋膠,將速凍組織置于其上,4℃冰箱預(yù)冷5~10 min 讓OCT膠浸透組織。2.取下組織置于錫箔或者玻片上,樣品托速凍。3.組織置于樣品托上,其上再添一層OCT膠,以完全覆蓋為宜,速凍架(PE)上30 min。
病理實(shí)驗(yàn)外包,染色包埋的知識(shí):知識(shí)點(diǎn)1:包埋的概念
組織經(jīng)過(guò)固定、脫水、透明和浸蠟等過(guò)程后,用包埋劑(石蠟、火棉膠、樹(shù)脂等)將組織塊包埋成塊,使得組織和包埋劑相熔一體并迅速冷卻,這個(gè)程序稱為包埋。
知識(shí)點(diǎn)2:組織石蠟包埋法
石蠟包埋法是制作光學(xué)顯微鏡切片的常規(guī)方法,包埋后的組織可以長(zhǎng)期保存。包埋的方法有包埋機(jī)包埋和手工包埋兩種。
知識(shí)點(diǎn)3:體液石蠟包埋法
痰液、胃液、尿液、、等可以行石蠟包埋。灌胃用60%乙醇是以15%氯化鈉加無(wú)水乙醇配制而成,灌胃前恒溫至55℃。痰液應(yīng)當(dāng)選用含血液的部分或較為的實(shí)體部分,滴上伊紅后用紙包好,然后用10%的中性甲醛固定,再經(jīng)常規(guī)脫水,透明、浸蠟并包埋。新鮮的胃液、尿液、、等體液標(biāo)本,倒去上層的澄清液體,將渾濁的液體放入離心管中,以轉(zhuǎn)速2000-3000轉(zhuǎn)每分鐘離心15分鐘,倒去上清液后,用10%中性甲醛固定沉淀物,然后進(jìn)行脫水透明、浸蠟、包埋。