分光分度計的組成部分
儀器組成
分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。
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分光光度計的技術參數
波長范圍:320∽1000nm
光譜帶寬:4nm
雜散光:≤0.5%(在360nm處)
波長準確度:優于±2nm
透射比準確度:≤±1nmT
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1)1900型等分光光度計,由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,因此在預熱時,應打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩。
2)放大器靈敏度換擋后,必須重新調零。
3)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調至,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范圍內則可以配套使用,若超出此范圍應考慮其對測試結果的影響。
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分光光度計的關鍵參數有哪些
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選擇可見和紫外可見的分光光度計所關注的*關鍵的指標有三點:一是波長范圍,二是波長準確度,三是雜散光參數。波長范圍的選擇是由用戶實驗需要所定,波長范圍越寬的價格越貴;波長準確度及雜散光參數的數值越低,表示性能越好。
影響顯色反應的主要因素
(1)顯色劑用量:通過實驗來確定*適用量;
(2)反應液的酸堿度(pH)溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及有色化合物組成的穩定性;
(3)反應溫度:不同的顯色反應需要不同的反應溫度,一般顯色反應可在室溫下完成;
(4)顯色反應時間:顯色反應的速度有快有慢;
(5)干擾離子的影響:應采用適當方法消除其影響;