腦組織組化實驗
1. 灌注固定用的針頭,一般都用注she針頭。灌注大鼠一般可用 10 到 12 號針頭,小鼠可用 6、7 號針頭,但很重要的一點是要把針頭的磨鈍而不是用銳利的針頭。
2. 關于穿刺:灌注大鼠時要把穿刺針的插入到升主動脈內,但不宜進入升主動脈過長,在動脈內見到針頭或插入約 1mm 左右即可;灌注小鼠時只要把針頭插入左心室內即可,不必要插入到升主動脈內。操作的要點是:,操作要迅速,剪開膈肌后,迅速沿腋前線剪開胸壁,并把胸前壁往上翻,暴露心臟;第二,一定要在明視野下操作,要剪開心包壁層的前壁,暴露升主動脈和肺動脈干的根部,確保穿剌針能進入升主動脈;第三,穿刺之前要用適當大小的血管鉗夾住心室以固定心臟,但不要夾得過緊,要讓心腔內留有一定的間隙,然后在心尖處輕輕旋轉針頭插入穿刺針。也可以用小剪刀在心尖處先剪開一個小口再插入穿刺針;第四,穿刺方向要正確,從心尖部開始,從左下方斜向右上方,若遇阻力要改變方向再試,不要用力蠻插。
3. 灌注用生理鹽水的量大鼠用 50ml 左右,小鼠用 10ml 左右,一般以從右心耳流出的液體清亮為標準;4% 多聚甲醛用量約相當于老鼠體重,如 300 克的老鼠用 300ml 左右。小鼠一般用 20-30ml。灌注速度先快后慢,可持續 1-2 個鐘頭,也可以稍快。取腦后置腦塊于 4% 多聚甲醛內 4 度后固定 4-6 個鐘頭。
膿毒癥:
是一種嚴重的全身性炎zheng反應綜合征,是由感ran引起的機體免yi系統過度ji活和炎zheng反應失控的疾病。免yi系統反應過于激烈,導致炎zheng反應泛濫,從而引發全身性炎zheng反應綜合征。
常見膿毒癥造模方法:
1.細菌感ran:通過注射細菌或其產生的細菌毒su來誘導膿毒癥模型。常用的細菌包括大腸桿jun、金黃色葡萄球jun、肺yan克雷伯菌等。
2.LPS誘導:脂多糖(LPS)是細菌外膜中的主要成分,具有強烈的mian疫ji活作用??梢酝ㄟ^注射LPS來誘導炎zheng反應和膿毒癥模型。常用的給藥途徑包括靜脈注射、腹腔注射或氣道暴露。